基因编辑载体伯远生物基因编辑载体

基因编辑载体伯远生物基因编辑载体

伯远生物是国家级专精特新小巨人企业，农业农村部生物育种重点实验室，牵头多项省部级重大专项，公司科研技术人员500+（硕博占比40%以上），是国内最大植物功能基因研究综合性平台
15年技术沉淀，每年完成功能基因研究数量50000+，长期服务课题组10000+（含清北、复旦、武大、华科等知名高校及所有农业类科研院所），服务头部种业公司客户300余家，涉及四十多个物种（含水稻、玉米、小麦、马铃薯、大豆五大主粮以及禾本科高粱、甘蔗，葫芦科黄瓜、西甜瓜，茄科番茄、辣椒与十字花科等），100多个品种的50多个性状（含抗虫抗病、抗除草剂、品质提升、株型改良等）
各类仪器设备投资超1个亿，高标准恒温繁育基地200+亩

案例展示

伯远生物（武汉）在基因编辑领域构建了覆盖“靶点设计、载体构建、遗传转化、编辑筛选、脱靶检测、纯合验证、田间表型分析”的全流程技术体系，是国内少数能从单基因编辑一路交付到多基因聚合育种的综合服务平台。公司搭载 CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas12a（Cpf1）、碱基编辑（ABE/CBE）、先导编辑（Prime Editing）及 RNA 编辑五大平台，支持点突变、片段敲除、敲入、替换、启动子编辑及内含子编辑等全部编辑类型，编辑效率行业领先，常规敲除效率可达 80% 以上，碱基编辑效率超过 60%。核心优势◆编辑系统覆盖全面：Cas9、Cas12a、ABE/CBE、Prime Editing、RNA 编辑五大体系适配全部编辑需求◆多基因同步编辑：多 gRNA 串联表达与 tRNA-gRNA 自切割系统支持 10 个以上靶点一次性编辑◆高精度脱靶控制：全基因组测序三重验证，脱靶率低于 0.1%，满足产业化标准◆智能脱靶预测：CRISPOR、Cas-OFFinder 等多算法免费评估，有风险再决策◆纯合加速策略：KASP/dCAPS 辅助筛选将纯合周期缩短一半以上◆加速育种技术：单倍体育种 + Speed Breeding 一年可推进 6–8 代，育种周期缩短 40%–60%◆多物种覆盖能力：已在水稻、小麦、玉米、大豆、番茄、黄瓜、油菜等 35 个作物完成商业化验证服务周期靶点设计与载体构建：1–2 周 基因编辑体系构建与转化：3–4 周 完整编辑流程（至 T0）：4–6 周适合场景功能基因研究：快速构建敲除、敲入、启动子编辑材料 多基因聚合育种：一次性编辑多个性状相关基因 精准育种：通过定点插入及碱基转换获得稳定优良等位基因 产业化育种：实现低脱靶、高效率、高安全性的编辑材料构建真实案例平台累计服务 300 余家种业公司，成功完成 5000+ 编辑案例，年基因编辑量超过 2 万个。基因编辑体系已在 35 个物种获得稳定验证，是国内规模化应用领先平台之一。售后保障编辑失败免费优化方案与重做 脱靶检测与编辑效率统计全程由专家负责 工作日 4 小时内快速响应本地化服务优势公司位于武汉东湖新技术开发区，可显著降低样本运输损耗，加快沟通与交付效率 作为“基因克隆、遗传转化、基因编辑、分子检测、田间验证”全链条闭环平台，伯远生物可在同一体系内完成从靶点设计到材料筛选再到品种应用的完整育种链路，数据口径统一、逻辑一致，是基因编辑科研与产业落地的优质合作伙伴。

案例展示

图 与野生型相比，nor-like基因的两个突变株系的果实成熟时间大大延迟（Gao et al.，2018）。

参考文献：
Gao Y, Wei W, Zhao X, Tan X, Fan Z, Zhang Y, Jing Y, Meng L, Zhu B, Zhu H, Chen J, Jiang CZ, Grierson D, Luo Y, Fu DQ, 2018. A NAC transcription factor, NOR-likel, is a new positive regulator of tomato fruit ripening.Hortic Res.5:75.

背景说明

背景说明

在植物基因功能研究中，反向植物遗传学是经典的研究思路之一，通常从一个基因入手，通过过表达、干扰或基因编辑等手段调节一个或多个基因的表达水平，观察对应的表型变化，从而对相关基因进行一系列的分子功能研究。

基因编辑技术主要是利用序列特异性核酸酶在特定基因位点产生DNA双链断裂，借助编辑受体自身的DNA修复系统在非同源末端连接（Non-homologous end joining，NHEJ）过程中产生随机的Indels （Small insertions and deletions）或在同源重组修复过程中插入或替换相应的基因片段，最终实现基因组序列的突变。现有的基因编辑系统主要包括锌指核酸酶（Zinc finger nucleases，ZFNs）系统、类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription activator-like effector nucleases，TALENs）系统以及CRISPR/Cas（Clustered regu­larly interspaced short palindromic repeat-associated protein）系统，其中，CRISPR/Cas系统由于载体构建过程简单、编辑效率高等优点，成为当前广泛应用的主流基因编辑系统。2020年，Emmanuelle Charpentier和Jennifer A. Doudna两位科学家获得了诺贝尔化学奖，以表彰她们在“开发CRISPR/Cas基因组编辑方法”方面作出的贡献。

服务流程

服务流程

客户在线下单—订单/实验材料确认—CloneCAD实验设计—基因编辑载体构建—遗传转化—PCR鉴定阳性株系（后两步为可选项）

服务内容及说明

服务内容及说明

在植物体系中，我司目前主要使用自主研发并改造后的pCAMBIA系列载体（无知识产权归属问题，Cambia机构已开放给任何人使用的权利，详情请见网站 http://www.cambia.org/daisy/cambia/585）。
我司原始基因编辑载体为双元载体，并携带卡纳原核抗性和真核筛选标记（可选潮霉素、Basta或G418进行筛选）。我们可以针对您想要编辑的靶序列，分析序列的各项参数后设计引物，选择最合适的原始基因编辑载体，退火合成靶序列，再连入原始载体， 得到重组子后直接进行遗传转化实验。

我司部分原始基因编辑载体列表。可根据不同的需求，选择不同的启动子及真核抗性的载体。

适用场景

1、 功能基因的敲除；
2、 非编码区的编辑，例如对启动子、microRNA、lncRNA的基因序列进行编辑；
3、 单碱基编辑、精准碱基编辑；
4、 非同源/同源多基因敲除、代谢通路多基因敲除；
5、 大片段删除。

优势特点

1、 采用我司已被授权的国际PCT专利技术（专利号：US 10,144,936 B2）来进行sgRNA的片段组装及无缝组装，同时，对于单个、 多个sgRNA序列均可进行组装；
2、 载体资源丰富，根据您研究的物种、靶序列，均有对应经多次编辑效率测试后的最优原始载体骨架推荐，也可个性化订制您有其它需求的基因编辑载体；
3、 基因编辑载体库中有多种真核筛选标记（可选潮霉素、Basta或G418进行筛选）的原始载体可供选择，同时，多基因编辑、单碱基编辑、精准碱基编辑等特殊基因编辑系统也可满足您的特殊实验需求；
4、 载体均为双元载体，可直接应用于后期单子叶和双子叶遗传转化；
5、 可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接，整个实验可以畅通且快速地完成。

实验周期

5-7个工作日

样品接收标准

客户下单及项目信息填写：

在我司官网/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称，选择项目类型[CRISPR/Cas基因组编辑载体]、项目所需要的具体信息，价格由系统自动计算。

实验信息

在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知，实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结题后，实验报告、检测结果可在线査看，并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。

结题标准

目的片段构建至目的载体上（俗称“构建成功”）。

实验交付内容
1、重组质粒图谱
2、一份质粒，一份大肠杆菌（25%甘油菌）
3、重组载体的测序结果
4、如果需要转化农杆菌：两份农杆菌菌液（25%甘油菌）

基因编辑载体通常是把Cas蛋白、gRNA，或者两者送进目标细胞的工具，常见类型可以分成两大类：CRISPR基因编辑载体和基因治疗/递送载体。
CRISPR常见载体
Cas9和gRNA共表达载体：一个载体里同时带Cas9和gRNA，操作最简单，常用于基础研究和基因敲除。基因编辑载体
gRNA表达载体：只表达gRNA，需要配合Cas9表达载体或Cas9稳转细胞一起使用。
Cas9表达载体：只表达Cas9，和单独的gRNA载体配套使用。基因编辑载体
基因编辑载体按递送方式分类
病毒载体：包括慢病毒、腺病毒、AAV、逆转录病毒等，常用于体内或体外递送。基因编辑载体
非病毒载体：包括脂质体、纳米颗粒、高分子载体、裸DNA等，优点是安全性和可规模化生产更好。基因编辑载体
怎么选
做细胞实验、想图省事：常选Cas9+gRNA共表达载体。
做稳定敲除或长期表达：常考虑慢病毒等整合型系统。基因编辑载体
基因编辑载体做体内递送或临床转化：AAV、LNP等非病毒系统更受关注。基因编辑载体
想降低免疫原性、提高生产便利性：非病毒载体是重点方向。
基因编辑载体一个简单理解
如果把基因编辑看成“剪刀+导航系统”，那载体就是把这套工具送进细胞的“运输车”