Tetradecapeptide (Biotinyl-Angiotensinogen (1-14) (porcine))

一、基础信息

  • 中文全称:生物素酰基肾素底物十四肽(猪源血管紧张素原 1-14)
  • 英文全称:Biotinyl-Renin Substrate Tetradecapeptide / Biotinyl-Angiotensinogen (1-14) (porcine)
  • 三字母序列:Biotin-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Leu-Val-Tyr-Ser
  • 单字母简写Bio-DRVYIHPFHLVYTS
  • 氨基酸数量:14 aa
  • 分子式:C85H123N21O20
  • 分子量:1759.05
  • 结构修饰
  1. N 端修饰:生物素 Biotin(简写 Bio/Biotinyl);
  2. 线性多肽,C 端游离羧基,无酰胺、焦谷氨酸、二硫键、环化修饰;
  3. 侧链氨基酸均无额外标记。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含 Tyr、Phe,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法测定浓度。

2.稳定性要点

  • 无 Cys、Met,无氧化降解风险;Tyr、Phe 为光敏残基,配制、储存全程避光;
  • 含 Pro 形成局部刚性转角,N 端生物素封闭氨基端,抵抗氨基肽酶水解;水溶液仍易被肾素、ACE 等蛋白酶切割,建议现配现用。

3.酸碱特性
酸性残基:Asp;碱性残基:Arg、His;整体近中性偏弱酸性;pH 6.0–7.6 PBS、血浆模拟缓冲液、肾素酶反应缓冲液稳定性良好。

4.溶解性
Ser 亲水残基搭配酸碱带电氨基酸,水溶性优异,常温中性缓冲液可完全溶解。

5.空间构象
天然肾素酶识别底物构象,Leu-Leu 切割位点暴露,N 端生物素不影响肾素结合与酶切反应,用于亲和捕获检测酶切产物。

三、来源背景

截取猪源血管紧张素原 N 端 1–14 天然序列,N 端偶联生物素标签;是体外肾素酶活检测专用底物肽,区别于无标记十四肽,可借助链霉亲和素实现产物分离与定量。

四、生物学功能

  1. 特异性作为肾素(Renin)天然底物,肾素在 Leu¹⁰-Leu¹¹ 位点切割,生成血管紧张素 I(1–10)与 C 端 4 肽片段;
  2. 生物素标签不干扰肾素结合、酶切效率,酶切后完整底物与产物均可通过链霉亲和素固相捕获;
  3. 产物血管紧张素 I 可进一步被 ACE 转化为血管紧张素 II,参与升压通路。

五、科研应用

  1. 体外肾素酶活定量检测,高通量筛选肾素抑制剂;
  2. 链霉亲和素 Pull-down 分离酶切底物 / 产物,HPLC、ELISA 定量分析;
  3. 肾素 - 血管紧张素系统(RAS)通路机制研究;
  4. 对比无标记肾素底物,验证生物素修饰对酶动力学参数的影响;
  5. 高血压相关药物体外筛选模型。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 常温避光配制;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃密封避光保存;长期分装 - 80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2–8 ℃避光密封可存放 7–10 天。